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巨細(xì)胞病毒性葡萄膜炎檢查化驗(yàn)

     1.病毒分離培養(yǎng)病毒分離培 養(yǎng)是確定診斷的重要依據(jù)。來(lái)自患者的多種標(biāo)本如血、尿、唾液、玻璃體標(biāo)本或視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜活組織檢查標(biāo)本等均可以用來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)。來(lái)自身體任何部位的標(biāo)本培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)CMV均有助于診斷。但由于感染后的個(gè)體可以排泄病毒長(zhǎng)達(dá)數(shù)月至數(shù)年之久,活組織檢查和培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)當(dāng)根據(jù)臨床癥狀和體征進(jìn)行解釋。從喉采集的標(biāo)本及尿液標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)最有價(jià)值,患者的視網(wǎng)膜下液、玻璃體、唾液腺、乳汁、精液、宮頸分泌液等也可發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。培養(yǎng)通常使用成纖維細(xì)胞,病毒形成特征性的細(xì)胞改變一般所需時(shí)間較長(zhǎng),從數(shù)天至6周不等,但多在2 ~ 3周。目前已研制出快速的培養(yǎng)系統(tǒng),在細(xì)胞培養(yǎng)8 ~ 32h利用免疫熒光單克隆抗體技術(shù),檢測(cè)早期和晚期蛋白,即可迅速確定診斷。     

    2.血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查可以確定新生兒或嬰兒是否有近期的或活動(dòng)性感染。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是測(cè)定抗CMV抗體最常用的方法,但此實(shí)驗(yàn)不能鑒別IgG和IgM ,這種方法的敏感性雖然達(dá)90% ,但免疫熒光和酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)更為敏感。陽(yáng)性的血清抗體意味著宿主曾經(jīng)感染過(guò)CMV ,但并不意味著一定有組織病變。動(dòng)態(tài)抗體測(cè)定發(fā)現(xiàn)IgG抗體效價(jià)增加4倍或4倍以上則對(duì)診斷有重要價(jià)值, 更高的抗體水平對(duì)活動(dòng)性CMV感染有更大的確診價(jià)值。抗CMVIgM抗體的出現(xiàn)提示有近期感染,但不能確定為原發(fā)感染,因?yàn)樵诟腥竞笏沙掷m(xù)數(shù)月,也可以在病毒敫活時(shí)出現(xiàn)。此外在類風(fēng)濕因子陽(yáng)性時(shí),也可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。值得說(shuō)明的是大量的IgG可以導(dǎo)致假陰性結(jié)果,這是因?yàn)镮gG與CMV抗原有高度的親和性,二者結(jié)合反使血清lgG7水平下降,尤其是在新生兒更是如此。新生兒由于接受了高水平的母體IgG ,假陰性結(jié)果可高達(dá)20%。IgM不能穿過(guò)胎盤(pán),臍帶血中的IgM提示宮內(nèi)感染,在成人抗體效價(jià)的意義較小,因?yàn)榇蠖鄶?shù)成人有陽(yáng)性的抗體效價(jià)。

      3.核酸測(cè)定  分子生物學(xué)技術(shù)為CMV性視網(wǎng)膜炎的診斷提供了很大幫助。原位雜交或PCR技術(shù)可以測(cè)定組織中的CMV基因組,原位雜交是測(cè)定組織中CMV DNA或RNA的一種敏感技術(shù),對(duì)于活動(dòng)性CMV性視網(wǎng)膜炎,此種技術(shù)既敏感又特異。但對(duì)于已接受治療的患者,由于無(wú)病毒復(fù)制,此種技術(shù)的診斷價(jià)值不是很大。PCR技術(shù)已用于測(cè)定房水、玻璃體、視網(wǎng)膜下液以及福爾馬林固定的眼組織切片中的CMV ,對(duì)于非典型病例的確診有重要價(jià)值。抗病毒治療可能對(duì)PCR的陽(yáng)性率有一定的影響。 Gerna等 發(fā)現(xiàn)在治療前12例患者的房水中PCR檢測(cè)結(jié)果均呈陽(yáng)性,但治療開(kāi)始后僅4例標(biāo)本陽(yáng)性。McCan等發(fā)現(xiàn)在未治療的CMV感染患者, PCR技術(shù)檢測(cè)的敏感性為95% ,但在治療后,其敏感性僅為48%。PCR技術(shù)是一種非常敏感的技術(shù),任何污染都可造成DNA擴(kuò)增,出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。所以在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)特別注意標(biāo)本污染的問(wèn)題。
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